動(dòng)物顯微注射的步驟介紹

顯微注射是在高倍倒置顯微鏡下，利用顯微操作器，控制顯微注射針在顯微鏡視野內(nèi)移動(dòng)的機(jī)械裝置，用來進(jìn)行細(xì)胞或早期胚胎操作的一種方法。

 

動(dòng)物顯微注射步驟:

 

1、注射針內(nèi)裝液：使用無菌的微量加樣器從微注射針的后部加入待注射樣品酚紅一滴。

2、注射針安裝和定位：

(1) 將裝液后的針頭的游離端安在連接器上，然后旋緊連接器以固定針頭，再將其固定到微操作儀的托針管上；

(2) 把載有待注射樣本的培養(yǎng)皿放在顯微鏡載物臺(tái)上，用低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)細(xì)胞調(diào)焦；

(3）移動(dòng)針頭并在顯微鏡下調(diào)整微操作儀，直到針頭的陰影在視野的中心上方；

(4）使用工作用放大倍數(shù)，調(diào)準(zhǔn)細(xì)胞焦距，找到針尖。

3、顯微注射：

（1）使針尖對(duì)準(zhǔn)細(xì)胞的待注射部位（細(xì)胞與針尖在同一焦面上），旋轉(zhuǎn)推進(jìn)旋鈕，針刺入細(xì)胞內(nèi)（卵膜、細(xì)胞膜、核膜）；

（2）旋轉(zhuǎn)加樣旋鈕，將樣本加入，并離開細(xì)胞。